一、产品概述
产品名称:生物配体快速偶联磁珠
产品简介:生物配体快速偶联磁珠表面为NHS基团修饰,能够与带有伯胺基团的蛋白和其他分子形成稳定的肽键,用于亲和纯化抗体、抗原和其他生物分子。与传统的羧基、氨基磁珠相比,表面含 NHS 基团的磁珠无需事先采用 EDC/NHS 或戊二醛进行活化,只需简单地将含伯氨基的生物配体溶解在试剂盒自带的 Coupling Buffer 中,室温下将蛋白与 NHS 磁珠混合 1~2 h 便可将生物配体共价偶联到磁珠上,具有操作简单、偶联条件温和、生物配体偶联快速高效等优点。磁珠偶联过程必需在不含任何氨基的缓冲溶剂中进行。人工操作时,使用磁性分离架实现磁珠与溶剂分离。也可采用自动化设备操作,自动化操作适合用于多样品的筛选。
产品特点:
1、简便,无需活化,可直接与生物配体共价偶联;
2、高效,生物配基偶联效率可达90%以上,大大高于羧基磁珠,同时配基的结合载量更高;
3、快速,1~2h便可完成生物配基偶联;
4、温和,室温或4℃偶联,偶联体系pH为5~9;
5、稳定,形成稳定的酰胺键,防止配基脱落。
6、良好的生物相容性,减少非特异性吸附。
适用范围:适用于含伯氨基的蛋白、抗体、酶、多肽、核酸等生物分子的共价偶联。
二、产品参数
产品名称
生物配体快速偶联磁珠 磁珠基材
交联磁性琼脂糖微球
磁珠粒径
10 μm ~30 μm
配基
N-羟基琥珀酰亚胺
配基密度
20~30 µmol/mL 磁珠
结合能力
20~30 mg 兔 IgG/mL 磁珠
磁珠悬液浓度
20%(v/v) 磁珠悬液
保存液
无水异丙醇
保存温度
2-8℃
操作环境温度
室温
三、应用领域
应用领域:体外诊断 ;免疫检测;细胞分选;免疫沉淀/共沉淀;蛋白/抗体分离纯化。
四、注意事项
1、磁珠对水分敏感。为了保证产品质量,在取样之后需立即盖上瓶盖,并用封口膜密封,于 4℃保存。
2、禁止将磁珠干燥或冷冻。干燥和冷冻操作可能导致磁珠的聚集从而丧失结合活性。
3、可通过间接法测定反应前后蛋白含量,或通过直接法检测偶联到磁珠表面的蛋白含量,使用280 nm附近的波长来测定蛋白含量是不可取的,因为 NHS 基团在 280 nm 波长附近有很强的吸收,会严重干扰检测结果。蛋白稳定剂会抑制抗体与磁珠的结合,因此在磁珠偶联抗体过程中,需要确保抗体保存体系中不存在含伯氨基的蛋白稳定剂。
4、 缓冲液中含有带伯胺的物质会抑制蛋白质偶联到磁珠表面,去除伯胺物质可采用透析和脱盐的方法。
5、 NHS 基团易水解,故在用 Washing buffer A 洗涤时,一定要参照说明书进行。
6、蛋白溶液要预先配制好, Washing buffer A 洗涤完毕后,要立即加入蛋白溶液进行偶联反应。
7、蛋白质和磁珠的偶联效率因蛋白质种类和性质差异而不同。一般而言,蛋白质浓度为≥3.0 mg/mL 时利于蛋白质偶联;然而,对于不同的蛋白其浓度需要优化。
- 1: 产品名称:生物配体快速偶联磁珠
- 2: 磁珠基材:交联磁性琼脂糖微球
- 3: 磁珠粒径:10 μm ~30 μm
- 4: 配基: N-羟基琥珀酰亚胺
- 5: 配基密度:20~30 µmol/mL 磁珠
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