在文献及其他专业中都有测定游离钙的方法，具体如下：

（1） 钙荧光探针负载；

（2）随机测定每管细胞悬液样品（以下简称样品）的单个细胞的荧光强度，记为F值。

（3）加入10%Triton X 100，（破膜用）；加入1 mmol/L氯化钙，（问题所在），吹打均匀，孵育1~10min，测定荧光即Fmax值。

（4）加入EGTA，20%26mu;l（钙螯合剂），孵育1~10min，激发波长488nm测定荧光，即Fmin值。

这个过程中的氯化钙的作用如何， 请高人指点， 谢谢。

因为正常血浆中Ca2＋浓度是1mM，细胞外液的Ca2＋对细胞内Ca2＋有影响。加0.1%triton是增加膜通透性，使细胞外Ca2＋进入细胞内，作为zui大值。加EGTA是为了螯合Ca2＋，作为zui小值.生理环境中细胞内钙离子浓度远低于细胞外液（大约1：10000），细胞膜对钙的通透性变化对细胞内钙影响很大。